text 2014 Jurnal Ilmu Ternak dan Veteriner Vol. 19 (3). P.231-238, 2014 Penelitian ini bertujuan mengembangkan teknik produksi, purifikasi dan pengukuran streptavidin yang efisien dan praktis. Streptomyces avidinii mula-mula dipropagasi dalam lempeng agar kemudian sel bakteri dari agar dipindahkan kedalam media cair sintetik (4,4 ml/cm2). Setelah 7 hari diagitasi diatas rotary shaker 200 rpm/min pada suhu ruangan (?28°C), sel bakteri dipeletkan, supernatan dikonsentrasikan menjadi 1/62 volume awal dengan amonium sulfat saturasi 75%. Setelah didialisis dalam larutan amonium carbonat pH 11, suspensi protein diadsorbsikan kedalam kolom iminobiotin agarose. Protein (streptavidin) yang teradsorbsi dielusi dengan larutan sodium asetat pH 4, eluat dikonsentrasikan dengan ultrafiltrasi dan disuspensikan dalam PBS. Pengukuran aktivitas binding streptavidin dilakukan dengan ELISA kompetitif, kompetisi antara streptavidin dalam sampel yang diukur dengan konjugat HRP-streptavidin memperebutkan biotin (IgG biotinil) yang diimobilisasi pada microtitre plate. ELISA ini mempunyai limit deteksi 0,16 ?g/ml streptavidin. Metode produksi dan purifikasi yang dikembangkan dalam penelitian ini menghasilkan 160 ?g/ml pada biakan supernatan. Setelah dikonsentrasikan dengan amonium sulfat menghasilkan 4 mg/ml (recovery 69%). Hasil akhir setelah kromatografi afiniti diperoleh streptavidin dengan konsentrasi 10 mg/ml (recovery 19%) dengan kemurnian tinggi (>95%). Streptavidin yang dihasilkan terlihat dalam bentuk streptavidin dimer ketika dianalisis dengan SDS PAGE, dan memiliki aktifitas dua kali lebih tinggi dibandingkan salah satu streptavidin komersial. Tarigan, Simson; Sumarningsih (Balai Besar Penelitian Veteriner) Streptavidin, Streptomyces avidinii, Amonium Sulfat, Iminobiotin Agarose, Aktivitas Binding ARTVET2021 ARTVET2021 221207 20221207080237 INLIS000000000017675 Converted from MARCXML to MODS version 3.5 using MARC21slim2MODS3-5.xsl (Revision 1.106 2014/12/19)